Набор SKYprep RNA Pure Micro Kit, 50 реакций

Описание

Важно:

• Все манипуляции при работе с РНК требуется проводить в перчатках для избегания загрязнения образца РНКазами.
• Все этапы протокола проводятся при комнатной температуре.
• Хранение образцов: образцы, предназначенные для выделения РНК, рекомендуется немедленно поместить в жидкий азот и хранить при -70°C.
• Не допускайте размораживания/замораживания образцов.
• К образцу после гомогенизации можно добавить буфер РЛ и хранить при -70°C несколько месяцев.
• Для размораживания образца поместите лизат на водяную баню и инкубируйте при 37°C.
• Не инкубируйте дольше, чем требуется для полной разморозки;

Разрушение и гомогенизация образцов:

Эффективное разрушение и гомогенизация стартового биоматериала – необходимый этап для всех методик выделения РНК. Разрушение и гомогенизация – это два различных этапа.
      Разрушение: полное разрушение мембран клеток и органелл необходимо для  высвобождения РНК.

• Различные образцы требуют использования разных методик для получения эффективного результата.
• Недостаточное разрушение приводит к снижению выхода РНК. Гомогенизация требуется для снижения вязкости лизатов после разрушения.

Гомогенизация: процесс фрагментации геномной ДНК с высокой молекулярной массой и других клеточных компонентов для создания гомогенного лизата. Неполная гомогенизация приводит к неэффективному связыванию РНК с мембраной спин-колонки CP1 и, следовательно, значительно снижает выход РНК. Гомогенизация может осуществляться с помощью гомогенизатора, вортекса, фильтрующей колонки, шприца или пипетки;
РНК-носитель

• В состав набора входит полиА РНК для использования в качестве РНК-носителя. При добавлении РНК-носителя к лизатам микроколичеств образцов РНК-носитель может увеличить выход тотальной РНК.
• РНК-носитель не требуется добавлять, если объем исходного образца превышает 5000 клеток или 10 мкг ткани;

Основные характеристики:

Максимальная емкость связывания - 45 мкг РНК
Максимальный объем образца - 700 мкл
Распределение длин РНК - > 200 п.о.
Минимальный объем элюции - 10 мкл
Максимальное стартовое количество биоматериала (клетки) - 5 × 10^5
Максимальное стартовое количество биоматериала (ткани) - 5 мг

Состав набора:

Буфер РЛ - 30 мл
Буфер РВ1 - 40 мл
Буфер РВ - 12 мл
РНК-носитель - 310 мкг
ДНКаза I (1500 ед) - 1 шт
Буфер РДД - 4 мл
ddH2O без РНКаз - 1 мл
ddH2O без РНКаз - 2 х 15 мл
Спин-колонки СР1 - 50 шт
1,5 мл собирательные пробирки - 50 шт
Инструкция - 1 шт

Общие характеристики